C8反相液相色譜柱是由具有光學活性的單體，固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相。通過引入手性環(huán)境使對映異構體間呈現物理特征的差異，從而達到光學異構體拆分的目的。要實現手性識別，手性化合物分子與手性固定相之間至少存在三種相互作用。
這種相互作用包括氫鍵、偶級-偶級作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。手性分離效果是多種相互作用共同作用的結果。這些相互作用通過影響包埋復合物的形成，特殊位點與分析物的鍵合等而改變手性分離結果。
由于這種作用力較微弱，因此需要仔細調節(jié)、優(yōu)化流動相和溫度以達到*分離效果。
C8反相液相色譜柱利用各種流動相和添加物可以有很多的應用。一些技術利用添加物可以改變或修飾填料的表面。有時候這些添加物有可能會污染鍵合相表面。
硅膠表面因為有著疏水鍵合相而有一些別的化學性質。殘留的硅烷醇存在于所有的硅膠鍵合填料中。這些硅烷醇具有弱酸性，因此能與某些待分析物合基質成分，特別 是堿性成分。
因為硅烷醇的pKa值大約是4.5，離子化能在中性pH條件下發(fā)生因此與陽離子產生靜電相互作用就有可能發(fā)生。較老的A型硅膠能容納高濃度金屬離子，而這能使硅膠表面的酸性更大甚至能發(fā)生金屬鰲合現象或清除一些化合物。
殘留硅烷醇在非末端封閉的硅膠合短鏈鍵合相如 C2或C4上更讓人煩惱。
