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固相萃取柱的使用技巧與操作步驟詳解
  • 更新日期:2024-12-30     信息來源:本站      瀏覽次數(shù):673
    •    一、操作步驟

        1、準(zhǔn)備工作
        確保實驗室環(huán)境清潔,實驗臺面整潔有序。準(zhǔn)備好所需的固相萃取柱、樣品、試劑、過濾設(shè)備等。
        戴上實驗手套和安全眼鏡,保障操作安全。
       
        2、樣品預(yù)處理
        將待處理樣品溶解在合適的溶劑中,根據(jù)樣品性質(zhì)選擇溶劑,如水溶性樣品可選擇水或緩沖溶液,有機樣品可用有機溶劑。
        進行過濾操作,可使用濾膜過濾,目的是去除樣品中的固體雜質(zhì),確保樣品溶液濃度適中,避免過濃或過稀影響后續(xù)萃取效果。
       
        3、裝填與平衡
        將固相萃取柱垂直放置在支架上。
        用適當(dāng)?shù)娜軇χM行平衡,對于C18柱等反相柱,常用甲醇進行預(yù)處理,甲醇能濕潤吸附劑表面并滲透鍵合烷基相,使硅膠表面更易被潤濕;正相柱則用樣品所在有機溶劑預(yù)處理;離子交換柱根據(jù)樣品基質(zhì)是極性或非極性溶劑采用相應(yīng)溶劑預(yù)處理,且要讓大約1ml的預(yù)處理溶劑留在管過濾片上以保持填料潤濕。
       固相萃取柱
        4、樣品加載
        緩慢地將預(yù)處理后的樣品溶液加入到萃取柱頂部,使樣品在固相填料中均勻分布。如果加入速度過快,樣品可能分布不均,導(dǎo)致部分填料未能與樣品充分接觸。
       
        5、沖洗填料
        若分析物保留在填料上,先用不能洗脫目標(biāo)化合物的溶液沖洗,去除雜質(zhì)。然后用比樣品基質(zhì)強度高但又不至于洗脫分析物的溶劑沖洗,例如對于弱酸性分析物,可以先用低pH值溶液沖洗雜質(zhì),再用適宜洗脫液洗脫。
       
        6、洗脫
        用少量能洗脫分析物的溶液沖洗填料,洗脫液在填料上停留適當(dāng)時間,分多次少量洗脫比一次大體積洗脫效果更好。
       
        7、收集洗脫液
        將洗脫液收集到試管或燒瓶中,注意避免交叉污染。
       
        8、再生、清洗和存儲
        根據(jù)需要,使用適當(dāng)再生溶劑將殘留雜質(zhì)和化合物洗脫,清洗后把萃取柱存放在干燥、避光處。
       
        9、記錄數(shù)據(jù)
        記錄樣品處理、使用情況和實驗結(jié)果等數(shù)據(jù),便于結(jié)果分析和實驗復(fù)現(xiàn)。
       
        二、使用技巧
        流速控制方面,如重力法使用時流速宜慢,讓樣品與填料充分作用。
        在選擇萃取柱時,要根據(jù)樣品性質(zhì)選擇合適的柱類型,像弱陰離子和酸性樣品可選柱。
        盡量避免復(fù)雜的洗脫程序,以簡單有效為原則。
        為了確保結(jié)果可靠,固相萃取柱應(yīng)使用一次。

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